Health 版 (精华区)

发信人: zjliu (秋天的萝卜), 信区: Health
标  题: 目前SARS检测技术的介绍
发信站: 哈工大紫丁香 (Thu Apr 24 15:19:42 2003) , 转信

发信人: Mary (greymouse), 信区: LifeScience
标  题: 目前SARS检测技术的介绍
发信站: 南京大学小百合站 (Wed Apr 23 23:08:39 2003)

目前的SARS检测方法介绍
1．     IFA（间接免疫荧光）方法；
荧光标记的抗IgG抗体 为二抗
病人血清为一抗
培养病毒的细胞裂解液做包被抗原
抗体产生通常需要10－14天时间，此方法可以检测发病10天之后的患者标本。
2.PCR方法：
收集病人样本（血清或者含漱液）
超速离心，浓缩病毒(标本采集对医务人员非常危险，超速离心对实验人员也很危险并且
收集的样本可能未必能捕捉到病毒存在或者标本处理不好造成RNA降解，所以此步骤为此
方法的难点，至今未克服)
用常规方法提取病毒RNA
RT-PCR，扩增相应条带（引物一般使用国际通用的7对引物）
凝胶电泳观察，或者引物用标记探针做实时PCR
3.抗原检测
这是最有希望早期诊断的方法
ELISA方法，
底板用病毒蛋白包被（可用细胞裂解液、基因工程方法得到的重组蛋白，或者合成肽）

用鼠或其他动物的病毒蛋白免疫的血清做一抗
检测病人标本中的抗原蛋白
但是具有抗原性的重组蛋白表达以及合成肽都需要时间，免疫血清的获得更需要时间
最顺利的情况也要一个半月才能做出来。这就是为什么这种检测试剂盒迟迟研制不出来
的原因。
上述试剂盒检测都要在P3级别的实验室中进行，以减少病毒污染和对检测人员的感染几
率
 



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※ 来源:．哈工大紫丁香 http://bbs.hit.edu.cn [FROM: 202.118.229.86]