Biology 版 (精华区)

发信人: Ingrid (灵儿), 信区: Biology
标  题: 检测基因突变的方法 (转载) 
发信站: 紫 丁 香 (Fri Sep  3 20:17:44 1999), 转信

发信人: zel (雨), 信区: biology 
标 题: 检测基因突变的方法 (转载) 
发信站: 饮水思源站 (Tue Jul 6 11:26:36 1999) , 站内信件 

【 以下文字转载自 LS 讨论区 】 
【 原文由 cly 所发表 】 
　　位于加州Santa Clara地区的一个公司推出一种测定基因
突变的技术，具体操作步骤如 下： 
　　1　从细胞中提取DNA，分离出目标基因(即要测定的基因)，
并大量复制； 
　　2　将目标基因切割成片段，每个片段用荧光化学物质标记
。将这些标记过的基因片段 在芯 片上"洗涤"。芯片上已经埋
植了数十亿条纤丝，即DNA探针，每一探针有20个碱基。 每一标记 
过的基因片段只和与之相匹配的探针结合，俗称杂交。最后用
激光扫描芯片，通过荧光图 案的类 
型读出被测基因片段的顺序； 
　　3　DNA由四种碱基组成，即A、T、C、G。芯片测试被测
基因的每一个位置，定出 该位置的碱 基种类。如果探针与
被测基因片段的顺序完全匹配，即按照A-T、C-G配对，这两股DNA 
就会紧紧 地结合在一块。既使这两股DNA中有一组碱基不匹
配，这两股DNA也会结合在一块。就 是松弛一 点，该位置
的荧光反映也就暗谈一点。因此DNA链结合松紧的程度可以
通过荧光的强弱反 映出 来，从而反映出被测DNA片段的顺序； 
　　4　由于DNA探针能识别被测基因片段上的特定区域。
所以让每一DNA探针测试基 因片段上的 一个位置。探针前面
7个碱基和后面7个碱基分别和基因片段待测区域上游和下游的7个 
碱基相匹 配。探针中间的碱基则用来测定基因片段待测区
域的碱基种类； 
　　5　将芯片分成许多小区，每一小区都有设定好的探针。
测定被测基因片段上的一个位 点需 要一组四个小区，因为
每一位点的碱基种类的可能性一般只有A、T、C、G四种。目前版 
本的芯片 上有400，000个小区，每一小区中可能埋植上千万
根具有特定碱基顺序的探针。 


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※ 来源:．紫 丁 香 bbs.hit.edu.cn．[FROM: ust.hit.edu.cn]