Biology 版 (精华区)

发信人: Ingrid (笑语), 信区: Biology
标  题: 肿瘤的基因治疗(4)
发信站: 哈工大紫丁香 (Tue Jun 22 15:40:06 1999), 转信

四．耐药基因疗法
    药物耐受是肿瘤治疗中常见的问题，它同时亦明显
阻碍了肿瘤化疗的疗效。肿瘤的耐药可分为两种类型：
原药耐药（PDR）和多药耐药（MDR）。PDR只是对诱导
的药物产生耐药性，而与其它药物无交叉耐药。MDR是指
肿瘤细胞对一种药物产生耐受后，对其它结构及功能不同
的药物也同样产生耐受。决定细胞这种耐药性的基因称为
多药耐药基因（Multi-drug resistence gene, MDR）。
人类基因组中的MDR包括MDR1和MDR2，正常细胞中有MDR蛋白
表达，并发挥一定功能。在各种肿瘤细胞中，MDR基因的
表达均有不同水平的提高。这种高水平的表达可能归因于
以下几个方面：（1）MDR基因扩增；（2）转录及转录后
调节使mRNA转录效率提高并增加mRNA稳定性；（3）翻译
及翻译后调节所致的翻译速度提高及MDR基因产物P－糖蛋白
稳定性增强。MDR的高水平表达使其蛋白产物P－糖蛋白的
量增加。P－糖蛋白是一种膜整合蛋白，具有ATP依赖的膜
泵结构，它可以同抗肿瘤药物结合，通过ATP提供能量，
将药物泵出胞外从而降低药物的细胞毒作用而出现耐药现象。
目前研究涉及的耐药基因主要为MDR基因，此外还包括
二氢叶酸脱氢酶基因（DHFR）和O6－甲基鸟嘌呤－DNA
甲基转移酶基因（MGMT）等。
    耐药基因用于基因治疗主要从两个方面着手：第一，
用反义RNA或DNA使MDR1基因灭活，从而缓解肿瘤化疗的
耐药性，提高化疗的疗效。第二，将MDR基因导入造血干
细胞，增强造血系统抵抗化疗药物的骨髓抑制作用的能力。
有人将MDR－1的反义核苷酸导入具有抗药性的红白血病细胞，
培养一段时间后这种细胞对阿霉素和正定霉素的抗药性明显下降[52]。Funato T[53]运用可降解MDR－1的核酶来抑制这种蛋白的表达。Walther W[54]等在一个逆转录病毒载体中把MDR1的启动子
与TNF的cDNA相连，这种载体被转入乳腺癌和结肠癌细胞系，
然后用MDR－1相关的药物诱导TNF表达，这时TNF的表达
依赖药物浓度及作用时间，这种载体系统对肿瘤的基因治疗
有一定意义。最近，Hesdorffer C[55]等已将MDR1基因用
于临床，他将患者作自体移植的造血干细胞导入含MDR cDNA
的逆转录病毒载体。这种转染细胞与非转染细胞一同回输给
患者，5个患者中有2个患者观察到MDR－1基因的稳定表达，
而且并未发现其它不利情况。这说明MDR基因用于临床治疗
已具有一定的安全性和可行性。二氢叶酸脱氢酶基因（DHFR）
为另一种耐药基因，它的表达能使细胞免受抗叶酸类药物的
毒性作用。Zhao RC[56]等在对慢性粒细胞性白血病的治疗中
将DHFR基因导入肿瘤细胞，转入的DHFR基因体外可稳定表达1年，
体内可稳定表达70天以上。转染后的造血干细胞对氨甲喋呤（methotrexate, MTX）介导的细胞毒产生抗性。James RI
[57]的研究工作同样证明了突变DHFR基因的导入可以使细胞
耐受致死剂量的MTX。Mineishi S[58]等将HSVtk基因同突变
DHFR基因连在同一个表达载体DC/SV6S31tk中，转染了DC/SV6S31tk
的3T3细胞所产生的MTX抗性明显高于只转染DHFR基因的细胞，
这项工作表明一种与其代谢相关基因的共表达会增强DHFR赋予
细胞的药物抗性。MGMT为一种DNA修复蛋白，可使细胞对亚硝
基脲类药物产生抗性。内源性MGMT的表达水平很低。MGMT基因
的转染可以保证亚硝基脲类药物剂量的提高并同时缓解大剂量
用药所产生的骨髓抑制，而且突变MGMT的耐药性远远大于野生
型MGMT[59]。

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