Biology 版 (精华区)

发信人: zhili (北侠), 信区: Biology
标  题: 基因治疗中的基因导入法（5）
发信站: 哈工大紫丁香 (Sat Nov 29 04:08:09 1997), 转信

 From: Amao.bbs@bbs.sjtu.edu.cn (阿毛)
 Date: 16 Jun 1997 06:41:15 GMT

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 Ⅲ。非病毒感染途径
 
 虽然基因导入法的研究起初侧重于病毒感染途径，现在很多实验室正在发展将基因
 导入哺乳类细胞的非病毒感染方法。重组病毒法在实验室里行之有效，在临床上也
 有可能是安全的，但是要确证其安全性极其费时费力。非病毒感染途径的主要优点
 就在于不想要的病毒遗传物质不会进入细胞。这类方法包括：化学方法如磷酸钙共
 沉淀，物理方法如微注射，脂质体包埋－膜融合法，分子连接－受体介导法，裸DNA
 直接注射法等。它们的共同缺点则在于所转入的DNA易随宿主细胞分裂而丢失。
 
 A. 脂质体包埋－膜融合法
 以一些带正电荷的脂、中性脂和DNA形成带净正电荷的复合体。带正电荷的脂分子以
 其带1至4个正电荷的头端与DNA相接近，并且使DNA结构紧密化，绕在脂类形成的内
 核上。它还使细胞膜或内吞体膜不稳定，发生扰动、融合，从而使DNA进入细胞质。
 DNA如何从细胞质进入细胞核内，目前还不清楚。融合的脂类则自然降解。该法可用
 于体内。局部给药可使阻塞的动脉内皮细胞转基因〖22〗，实质性肿瘤细胞转基因
 〖23〗等。临床用该法治疗肿瘤和囊性纤维病已在进行。
 
  B。分子连接－受体介导法
  多聚赖氨酸带有多个正电荷，能与DNA相接近并使其结构紧密化。将多聚赖氨酸与
 某种能结合细胞的配体化学连接，DNA、多聚赖氨酸、配体三者形成复合物。当配体
 与靶细胞上受体结合，整个复合物被内吞入细胞〖24〗。如，静脉注射DNA－多聚赖
 氨酸－Asialoglycoprotein连接复合物，Asialoglycoprotein与肝细胞表面受体结
 合，DNA也随之被内吞。常用的配体还有转铁蛋白（与分裂细胞结合）等等。由于多
 聚赖氨酸对多种细胞有高亲和力，连接复合物对靶细胞的特异性不甚强。除多聚赖
 氨酸外，其它分子也可将DNA和配体连接，但缺乏DNA紧密化能力，需另加试剂。分
 子连接－受体介导法的最大问题在于：复合物被内吞后即被送往溶酶体降解，不能
 溶解胞内体膜而逃跑的复合物，其DNA进入胞浆的量就很少。因而，连接复合物中必
 须加入胞内体膜溶解剂，如，腺病毒〖25, 26〗。当DNA直接连于腺病毒外表面时，
 转基因尤为有效〖27〗。其它一些病毒，如，对人体一般不致病而有很强溶膜作用
 的鸡腺病毒〖28〗，以及一些肽段〖29〗也可使用。
  
     C。裸DNA直接注射法
 直接注射至体内的裸DNA可被肌肉〖30〗等组织摄取。其表达水平低，但时效长，可
 用作疫苗。如只需短暂地表达内皮细胞生长因子，裸DNA也可用于基因治疗〖31〗。
 
 
 
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         当爱在正确的道路上，爱会使你静心；
         当静心在正确的道路上，静心会使你爱。
 
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